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骨肉瘤miR-96的表達與細胞增殖和凋亡
發布時間:2019-06-12 13:49:13| 瀏覽次數:
TAG: 骨肉瘤 miR-96 反義單核苷酸 腫瘤抑制


       [摘要] 背景與目的:微小RNA(microRNA,miRNA)是一類內源性的非編碼小分子RNA,其主要通過與靶 mRNA作用抑制轉錄后的翻譯。miR-96是在多類腫瘤細胞中高表達的小RNA分子。本研究旨在檢測miR-96在骨肉 瘤組織中的表達,并研究其在骨肉瘤細胞的增殖、細胞周期及凋亡中的意義。方法:運用TagMan MGB探針法檢 測40例骨肉瘤組織及對應的骨組織中miR-96的表達;應用反義技術降低骨肉瘤細胞(U2-OS和MG-63)中miR-96的 表達;采用MTT比色法檢測細胞增殖的改變;應用流式細胞技術檢測骨肉瘤細胞細胞周期和凋亡情況。結果: 在40例骨肉瘤組織中,62.5%(25/40)的骨肉瘤組織miR-96表達明顯高于對應骨組織(P<0.05);反義miR-96轉染 骨肉瘤細胞U2-OS和MG-63后,miR-96的表達明顯降低,U2-OS和MG-63骨肉瘤細胞生長受到明顯抑制,其生長主 要停滯在G0/G1期,而S期和G2/M期細胞的比例下降。另外,降低miR-96的表達,U2-OS和MG-63骨肉瘤細胞早期 凋亡明顯增加。結論:miR-96在骨肉瘤組織中表達明顯上調,降低其表達能明顯抑制U2-OS和MG-63骨肉瘤細胞 的生長,并誘導細胞早期凋亡增加,miR-96可能成為骨肉瘤基因表達調控的新靶點。  
       [關鍵詞] 骨肉瘤;miR-96;反義單核苷酸;腫瘤抑制
       
       3 討  論   miRNAs是一類新的基因調控因子,在控 制細胞的生長發育、分化、血管形成、凋亡等 過程中發揮著十分重要的作用[3,8]。miRNA通 過與靶mRNA的3’非編碼區近乎完全互補結 合在轉錄后水平使其降解,或者與之不完全 互補結合在翻譯水平抑制蛋白合成,從而在基 因表達中發揮重要的調節作用。隨著越來越 多的miRNA被鑒定和深入研究,近年來研究發 現miRNAs與惡性腫瘤關系密切,大約有調控 miRNAs編碼基因位的52%位于腫瘤相關染色體 區域[9-10]。有研究者認為miRNA實際上可作為 癌基因或者抑癌基因而發揮作用。因此miRNAs 可能成為診斷腫瘤的新的分子標志和判斷腫瘤 治療及預后的分子靶點,而且miRNAs在轉錄后 水平調節靶基因的表達,更有助于惡性腫瘤的 早期發現、早期診斷和早期治療,其必將具有 廣闊的臨床應用前景[11]。   骨肉瘤是起源于成骨組織的一種原發性惡 性腫瘤,好發于青少年長管狀骨的干端,惡 性程度高,預后差。雖然放化療及手術治療的 水平在逐漸提高,但仍約有50%的患者治療失 敗,原因就在于腫瘤的早期轉移以及耐藥性的 出現[1,12]。因此,急需找到新的腫瘤標志物來 進一步提高骨肉瘤的早期診療效果。近年隨著 miRNAs研究的不斷深入,發現大量異常表達 的miRNAs通過調控靶基因的表達而調節包括 骨肉瘤在內的多種惡性腫瘤的發生發展,因此 大規模的篩選腫瘤發生發展過程中異常表達的 miRNAs將為人們全面認識腫瘤的生物學特性 發揮重要作用,也為骨肉瘤的早期診治提供了 新的希望。最近研究發現miR-96在多種惡性腫 瘤中表達失調[4-7]。此外,Chen等[13]研究發 現,降低miR-96的表達可以明顯抑制肝癌細胞 的侵襲遷移能力。但miR-96在骨肉瘤中的表達 及作用目前尚不清楚。
 
 
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