摘要:目的探討重組腺病毒介導的大鼠增殖抑制基因(rHSG)對大鼠蛛網膜下腔出血(SAH)后基底動脈(BA)遲發型腦血管痙攣(DCV)的影響。方法SD大鼠156只隨機分為5組:SAH組(A組,36只)、SAH+Adv-rHSG-GFP組(B組,36只)、SAH+Adv-GFP組(c組,36只)、假手術組(D組,36只)和正常對照組(E組,12只)。采用枕大池二次注血法建立大鼠SAH模型,假手術組注射等量生理鹽水。將重組腺病毒Adv-rHSG-GFP及空載腺病毒Adv-GFP分別轉染B、C組大鼠BA。設立4d、7d、10d3個觀測點,HE染色后測量BA內徑周長及血管壁厚度,觀察血管結構改變;免疫組化染色后檢測BA中rHSG蛋白表達;用RT-PCR法檢測BA中rHSGmRNA表達。結果A、C組各時相BA有不同程度的內膜增厚皺折、平滑肌層增厚等增殖性改變。與A組及C組相比,B組7d、10d時BA血管痙攣明顯緩解,且rHSG蛋白及mRNA表達明顯增強(P<0.01)。結論rHSG的過表達可以減輕SAH后血管壁的增殖和DCV,為外源性rHSG基岡治療DCV提供了實驗依據。
   
   關鍵詞:大鼠;蛛網膜下腔出血;遲發性腦血管痙攣;大鼠增殖抑制基因;增殖細胞核抗原
   
   
   3討論
   DCV是十分復雜的病理生理學過程,探索新的預防及治療方法對于降低SAH患者的死亡率、殘疾率具有重大的意義。過去研究表明DCV是多種因素如氧合血紅蛋白(oxyHb)、內皮素-1(ET-1)、PKc激酶、免疫炎癥反應以及補體復合物成分等綜合作用的結果,但不能做出較為滿意的解釋。近年來,一些學者認為SAH后DCV的發生是血管壁結構改變的結果,其中血管平滑肌細胞增殖尤為重要。
   rHSG被證實有抑制血管細胞的增殖、遷移和重塑的作用。前期實驗證明,大鼠SAH后4~16d,BA血管壁rHSGmRNA相對表達量降低,以SAH后7d最為明顯,提示rHSG和SAH后DCV有密切關系。本實驗用重組腺病毒Adv-rHSG-GFP轉染SAH大鼠BA,旨在探討外源性rHSG對SAH后DCV的影響。結果顯示,外源性rHSG在大鼠SAH后第7d表達量最高,在SAH后第10d下降至第4d水平,明顯減輕了DCV的程度,表明外源性rHSG在BA中表達持久,采用基因治療有足夠的時間窗,為臨床預防和治療SAH后DCV提供了實驗依據。