【摘要】目的:檢測新建體外受精實驗室培養體系的可靠與否,是否符合人類胚胎體外培養的要求。方法:對昆明白小鼠進行超促排卵,手術獲取昆明白小鼠雌雄配子進行體外受精和體內受精的胚胎;并進行體外培養觀察兩組鼠胚的受精率、2-細胞率、囊胚率及采用密度梯度離心法和上游法兩種精液處理方法對小鼠體外受精胚胎發育情況的影響。結果:進行了30個周期的體內受精體外培養實驗,共獲卵1136枚;進行了35個周期的體外受精實驗,共獲卵1486枚。體內受精組獲得的受精率(93.13±1.46)%和2-細胞率(94.52±1.67)%高于體外受精組的受精率(84.39±2.87)%和2-細胞率(87.80±3.21)%,兩組間差異有統計學意義(P<0.05)。密度梯度離心法處理精液后,其受精率(90.32±3.14)%和2-細胞率(88.54±2.28)%高于上游法的受精率(76.46±2.35)%和2-細胞率(82.67±2.62)%,兩者差異有統計學意義(P<0.05)。結論:小鼠卵母細胞體內受精和體外受精后均有高的成胚率,體內受精后進行體外培養優于體外受精后培養,采用密度梯度離心處理精液實施體外受精優于上游法,鼠胚實驗可對新建胚胎培養室的培養體系進行評估。
   
   【關鍵詞】鼠胚實驗;體外受精;質量控制;胚胎培養
   
   
   3討論
   胚胎實驗室是人類ART實施的重要場所,培養室所處的環境會對ART結局產生重要影響怕1,為了獲得更好的胚胎發育質量和更高妊娠率,培養室必須有嚴格的質量控制體系。小鼠胚胎生物監測已經成為評估新建體外受精實驗室環境條件和培養體系質量效果好壞的最為廣泛應用的方法。通過連續的動態觀察小鼠胚胎的發育狀況,在反應胚胎發育狀況的同時,可檢測培養室的環境條件,包括空氣質量、溫度、濕度以及各種耗材、培養液、培養箱和技術人員操作水平等。
   本實驗條件下,在對體外受精實驗室培養體系進行檢測時,我們采用了兩種來源的小鼠胚胎,即體內受精胚胎和體外受精胚胎,其結果顯示小鼠體內和體外受精率分別為(93.13±1.46)%和(84.39±2.87)%,雖然兩種受精方法都大于80%,都符合鼠胚生物監測的要求,達到質控的要求,但是兩種受精方法的效果不同。產生這種現象的原因可能是:①在體內卵母細胞處于一個無光、恒溫、恒濕、低氧的環境中,母體內分泌、子宮及輸卵管會分泌一些物質促進受精;在體外卵母細胞不具備任何保護和屏障功能,可能暴露于含有害氣體的空氣中,面臨溫度、滲透壓、pH等變化的應激,降低精卵結合的機會,使受精率下降。