[摘要]:目的構建基因真核表達載體并探討MIER3對結直腸癌細胞生物學特性的影響,應用生物信息學方法對MIER3及其相互作用蛋白進行預測分析。方法應用Real-timePCR及Westernblot方法檢測MIER3在8例結腸癌及相應癌旁正常組織中mRNA和蛋白表達水平的差異表達。結論MIER3與結直腸癌增殖、侵襲密切相關,為進一步深入闡明MIER3在結直腸癌發生發展中的作用奠定基礎。
   
   [關鍵詞]:MIER3;增殖;侵襲;生物信息學
   
   3討論
   我們通過對MIER3在結直腸癌組織中的表達進行初步檢測,證實MIER3在結直腸癌組織中出現異常的表達下調,提示MIER3與結直腸癌發生發展密切相關。同時,我們通過克隆構建真核表達載體,利用體外過表達功能實驗檢測發現MIER3表達上調后可明顯抑制結直癌細胞株的增殖及侵襲能力。這些發現提示MIER3在結直腸癌中可能具有抑癌基因的特點,MIER3的表達失調可能在結直腸癌發生演進中承擔著重要生物學功能。進一步,我們應用基于保守的蛋白質相互作用的生物信息學預測方法,通過查詢模式生物黑腹果蠅的蛋白數據庫,初步確定NAT9為MIER3的候選相互作用蛋白。NAT9是N-乙酰基轉移酶超家族(NAT)成員之一,NAT家族是人體內重要的Ⅱ相代謝酶,在人體對芳香胺類致癌物質的活化及滅活以及某些藥物的代謝過程中起著重要作用,其活性存在遺傳多態性,并與腫瘤的易感性密切相關。
   綜合上述實驗結果與分析,我們推測MIER3與結直腸癌發生發展密切相關,MIER3的表達失調和功能異常在結直腸癌的發生演進中可能承擔著重要角色,MIER3在結直腸癌中的具體功能及相關機制值得進一步深入研究。